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題名 | 核酸探針雜合反應或反轉錄聚合酶連鎖反應偵測喜姆比蘭嵌紋病毒之比較=Detection of Cymbidium Mosaic Potexvirus by Hybridization with cDNA Probes or Reverse Transcription-polymerase Chain Reaction |
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作者 | 王惠亮; 王嬿婷; 廖麗貞; | 書刊名 | 植物保護學會會刊 |
卷期 | 42:1 2000.03[民89.03] |
頁次 | 頁25-42 |
分類號 | 435.431 |
關鍵詞 | 喜姆比蘭嵌紋病毒; 核酸探針雜合反應; 反轉錄聚合酶連鎖反應; Cymbidium mosaic virus; cDNA hybridization; Reverse transcription-polymerase chain reaction; |
語文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 喜姆比蘭嵌紋病毒(cymbidium mosaic virus, CyMV)一直是蘭花栽培者最主要的障礙之一, 除了會影響蘭花生長外,其防治甚為困難,故快速正確的診斷病毒的存在,將有助於本病毒 之防治管理。試驗結果顯示,核酸探針雜合偵測法(cDNA probe hybridization):20鹼基之核酸探針可測得100 ng/μl 之病毒及10 ng/μl之病毒RNA;455 bp逢機引子標定之核酸探針可測得1 ng/μl 之病毒及100 pg/μl之病毒RNA;455 bp之核酸經反轉錄聚合��連鎖反應標定之探針可測得100 pg/μl之病毒及100 pg/μl之病毒 RNA。RT-PCR 可測到1pg/μl之病毒RNA,若結合核酸探針雜合反應亦只可測得1 pg/μl之病毒 RNA。另外本研究以DIG-11-dUTP直接參與RT-PCR的方式發展出改良式反轉錄聚合��連鎖反應來進行病毒的偵測,其靈敏度高過前述所有之方法,可偵測低至10 fg/μl之病毒RNA。利用組織轉印法配合核酸探針雜合反應,可直接對病葉進行偵測。 |
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