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題 名 | 以限制酶片段多形分析比較胸膜肺炎放線桿菌血清型間第1型細胞毒素基因=Comparison of Actinobacillus Pleuropneumoniae RTX-Toxin I Gene (apxI) Among Serotypes by Restriction Fragment Length Polymorphism |
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作 者 | 張惟茗; 賴秀穗; 楊喜金; 吳義興; 蕭終融; | 書刊名 | 臺灣省家畜衛生試驗所研究報告 |
卷 期 | 33 1997[民86.] |
頁 次 | 頁29-35 |
分類號 | 437.24 |
關鍵詞 | 胸膜肺炎放線桿菌; 第1型細胞毒素; Actinobacillus pleuropneumoniae; Apxl; |
語 文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 利用依照第 1 型細胞毒素結構基因( apxIA )序列設計的第 1 至 3 對引子( primer ), 與豬胸膜肺炎放線桿菌菌( Actinobacillus pleuropneumoniae, Ap )第 1 至 12 血清型菌體核酸進行聚合�t連鎖反應( polymerase chain reaction, PCR )。結果 第 1、2 對引子在第 1、5、9、10 和 11 血清型都能分別產生長度為 2.6kb 和 1.7 kb 的 核酸片段,但是由第 3 對引子所作的 PCR 反應所增幅出幾乎完整 apxIA 基因約 3kb 的核 酸片段卻只有出現在第 1、9 和 11 血清型。 因此 apxIA 基因存在於第 1、5、9、10 和 11血清型,但是第 5 和第 10 血清型之 apxIA 基因在 2994 至 3011 bp 處(第 3 對引子 )之核酸序列與第 1、9 和 11 型者有所不同。 又分別以 AP 第 1、5、9、10 和 11 血清型菌體核酸為模版,利用第 4 對引子增幅出長約 3.9 kb 的 apxICA, 再分別以 10 種限制�t切割後發現, 第 1、9 和 11 血清型 apxI 之 Hind Ⅲ( 1489-1494 bp )、 Nae Ⅰ( 1449-1454 bp )、Bcl Ⅰ( 2966-2971 bp )、 ApaL Ⅰ(約 3100 bp )切割位和第 5、10 血清型不同,KpnⅠ , Ata Ⅱ, SspⅠ,Nco Ⅰ,EcoRV,Bst Ⅱ切割處則無不同。 因此 apx IA 在約 1.5 kb 和 3 kb 處可能為主要變 異區。此外以另外 8 株第 1 血清型分離株菌體核酸為模版增幅之 apxIA,使用限制�t切割 後,其型態並無差異。 |
英文摘要 | Four Primers according to the sequence of activator gene(apxIC) and structural gene(apxIA) of ApxI were synthesized and used for polymerase chain reaction (PCR) to amplify specific DNA fragment among 12 Ap serotypes. The results indicated that serotype 1, 5, 9, 10 and 11 had an expected length of amplified DNA fragment with 3 primers. However, serotype 1,9 and 11 had also obtained a particular length with the other primer accordingto the sequence of apxICA gene. The sequences between 2994 and 3011 of apxIA of serotype 5,10 detected by PCR were found different with those of serotype 1,9 and 11. The PCR amplified 3.9 kb DNA fragments of apxICA from serotype 1,5,9,10 and 11 were analyzed by digestion with 10 restriction enzymes. The Hind Ⅲ、Nae Ⅰ、Bcl Ⅰ、 and ApaL Ⅰ cutting sites of apxIA of serotype 1,9 and 11 were different from those of serotype 5 and 10. The restriction map of the 3kb DNA fragment of apxIA amplified from the local isolate of serotype 1, were identical to those reported previously. Chang WM and Lai SS. Comparison of Actinobacillus pleuropneumoniae PTX-toxin I (apxI) among serotypes. |
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