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題 名 | 白絹病菌核酸探針之製備與分析=Development and Analysis of DNA Probe of Sclerotium Rolfsii |
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作 者 | 陳隆鐘; 陳天枝; 余瑞卿; 鍾依紋; 葉瑩; | 書刊名 | 植物病理學會刊 |
卷 期 | 6:4 1997.12[民86.12] |
頁 次 | 頁181-190 |
分類號 | 433.4 |
關鍵詞 | 白絹病菌; 核酸探針; Sclerotium rolfsii; DNA probe; |
語 文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 白絹病菌 (Sclerotium rolfsii) 804001、 804021 菌株之粒腺體核酸 (mtDNA) 經限制酵素 EcoRI 處理後,與載體 pBluescript(SK+) 接合,再轉形於 Escherichia coli DH5 α內, 構築一基因庫。 由其中逢機選取八選殖株, 製備為核酸探針, 分別和 Sclerotium rolfsii、Sclerotinia sclerotiorum 及 Rhizoctonia solani 之總量 DNA 進 行點雜配 (dot hybridization) 反應, 結果以探針 pSRS53 為白絹病菌較具專一性之核酸 片段,並以點雜配法進行其核酸探針靈敏度測定,以探針 pSRS53 之核酸片段連續稀釋濃度 為偵測對象時其靈敏度可達 10ug,若以菌株 804027 之總量 DNA 連續稀釋濃度為偵測對象 時其靈敏度可達 10ug, 用以進行百合種球 (白雪內、外鱗片和白狐貍內、外鱗片以及白雪 、白狐貍種球外土壤萃取液 ) 組織靈敏度測定, 則可偵測之最低濃度各為 10ug、 10ug、 10ug、10ug、10ug、10ug。 |
英文摘要 | A genomic library of mitochondrial DNA, digested with EcoR I restriction enzyme from isolates of 804001、 804021 of Sclerotium rolfsii was constructed in the vector of pBluescript (SK+), and transformed into E. coli DH5 α. Randomly selected recombinant clones designated as pSRS14, pSRS28, pSRS69, pSRS96,pSRS29,pSRS43, pSRS53 and pSRS67 were nonradioactive labelled. From dot-blot hybridization analysis with total DNA of S. rolfsii, Sclerotinia sclerotiorum and Rhizoctonia solani, we found that probe of pSRS53 was specifically hybridized to S. rolfsii isolates. In sensitivity of the probe of pSRS53 analysis, it could be detected the insert DNA of pSRS53 in series up to 10ug and the total DNA of 804027 in series up to 10ug. And then the sensitivity of the probe of pSRS53 to genomic DNA from internal, external scale bud of White snow and White fox, and soil extracts of lilly corms could be detected up to 10ug, 10ug, 10ug, 10ug, 10ug, 10ug, respectively. |
本系統中英文摘要資訊取自各篇刊載內容。