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題名 | 黑鯛第一型類胰島素生長因子基因片段之合成 |
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作者 | 吳鴻程; 范晉嘉; 陳泓志; 張繼堯; 吳金洌; | 書刊名 | 嘉南學報 |
卷期 | 20 1994.11[民83.11] |
頁次 | 頁138-147 |
分類號 | 387.1015 |
關鍵詞 | 黑鯛; 核苷聚合酶連鎖反應; 類胰島素生長因子; DNA核苷引子; Black seabream; Polymerase chain reaction; Insulin-like growth factor I; DNA primer; |
語文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 依據黑鯛第一型類胰島素生長因子(Insulin-like growth factor I,IGF-1)DNA 序列,合成長度為23個核��酸的S核��引子,19個核��酸的B核��引子,21個 核甘酸的D核��引子和22個核��酸的E核��引子。配對後的核��引子利用Vent 核背聚合�t進行連鎖反應;其反應條件為:解鏈溫度94℃(反應1分鐘)。黏合溫度 65。C(反應2分鐘),合成溫度72℃(反應2分鐘),共重覆35次循環。經核��合�t 連鎖反應後,可生成B區域到D區域201個核��酸DNA片段;B區域到E區域 423個核��酸的DNA片段,S區域到E區域552個核��酸的DNA片段。S區域 到D區域的DNA片段,則在解鏈溫度94℃(反應30秒),黏合溫度54℃(反應30 秒),合成溫度74。C(反應30秒),共進行35次循環的條件下可生成330個核��酸 之DNA片段。 |
英文摘要 | Four oligonuclotide primers, primer S (23 bases), primeer B (19 bases), primer D (21 bases)and primer E (22 bases), were synthesized according to the black seabream (Acanthopagrus schegeli) insulin-like growth factor I (IGF-I) DNA sequence to amplify the ICF-I DNA fragments.The results found that primeer S, primer E produced 552 base pairs ICF-I DNA fragment, primer B, primer D producted 201 base pairs IGF-I DNA fragment, and primer B, primer D produced 423 base pairs IGF-I fragment at denatured 1 minute at 94℃, annealized 2 minutes at 65 ℃, and extended 2 minutes at 72℃ by polymerase chain reaction. Primer S and primer D producted 330 base pairs IGF-I DNA fragment at denatured 30 seconds at 94℃, annealized 30 seconds at 54℃ and extended 30 seconds at 74℃ by polymerase chain reaction. |
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