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題名 | 單分子拴球實驗在生醫研究的應用=Single-Molecule Tethered Particle Motion in Biomedical Research |
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作者 | 陳晏誠; 范秀芳; 李弘文; | 書刊名 | 科儀新知 |
卷期 | 31:1=171 2009.08[民98.08] |
頁次 | 頁38-43 |
專輯 | 單分子檢測專題 |
分類號 | 361.4 |
關鍵詞 | 單分子拴球實驗; 單分子技術; 蛋白質; DNA; |
語文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 單分子拴球實驗為一簡單量測蛋白質與DNA作用情形的單分子技術。利用高解析的光學顯微技術,我們得以準確地觀測接連在DNA及玻片表面的乳膠小球之布朗運動情形,並藉由其布朗運動的大小直接對應到在生化反應中DNA長度的變化,因此單分子拴球實驗已被廣泛地應用於研究單一蛋白質與單一DNA分子作用之反應機制。我們更利用在乳膠小球上施加一微小伸展力來抑制其布朗運動大小,並藉此改良出施力式拴球實驗。此施力設計不僅改善實驗之解析度,擴展可應用之DNA 長度範圍,並得到一理論可預測之DNA長度與布朗運動的線性關係。此施力式拴球實驗已被用來研究RecBCD解螺旋與DNA分子作用情形,發現此解螺旋酶分子沿DNA移動時,藉由辨識DNA特殊序列來調控其性質,並表現出移動速率由快轉慢之改變。 |
英文摘要 | Tethered particle motion (TPM) method is a simple technique to study the protein-DNA interactions at the single molecule level. By directly imaging the Brownian motion of the polystyrene bead, which is tethered to the coverslip through a DNA molecule, TPM allows the real-time measurement of DNA length change during enzymatic processes. We developed a force TPM experiment to further improve the resolution of the measurement, to extend the DNA application range and to achieve a linear and predictable relation between DNA length and bead Brownian motion. This FTPM method has been used to study the motion of a DNA helicase, RecBCD, along individual duplex DNA molecules and provided insights on its protein-DNA interaction. |
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