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題 名 | 芒果炭疽病菌分生孢子、發芽管及附著器胞外粘質之偵測及定性=Localization and Characterization of Extracellular Matrix in Colletotrichum Gloeosporioides during Germination and Appressorium Formation |
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作 者 | 張幼莉; 郭克忠; | 書刊名 | 植物保護學會會刊 |
卷 期 | 42:1 2000.03[民89.03] |
頁 次 | 頁53-66 |
分類號 | 435.325 |
關鍵詞 | 芒果炭疽病菌; 胞外粘質; 金膠; 染劑; 酵素; 細胞凝聚素; Extracellular matrix; Colletotrichum gloeosporioides; Colloid gold; Dyes; Hydrolyses; Lectins; |
語 文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 利用低溫掃瞄式電子顯微鏡、染劑、酵素及螢光標記細胞凝聚素的方法對芒果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides分生孢子、發芽管及附著器胞外粘質 (extracellular matrix, ECM)之組成加以偵測及定性。定時觀察ECM在發芽前30分鐘 便開始分泌,隨後持續至附著器發育完成。另以11種不同染劑及非特異性金膠 (colloid gold)標定芒果炭疽病菌發芽過程中分生孢子、發芽管及附著器所產生的胞外粘質,其中蛋白質染劑alcian blue 8 GX及aniline blue只可使附著器呈色,toluidine blue O、nigrosin、coomassie blue R 250、fast green FCF、amido black 10 B、methylene blue及碳水化合物染劑periodic acid-Schiff (PAS)可以將孢子、發 芽管及附著器染色。但供試材料中除了合成塑膠染料ACP liquid acrylics以正染、陰染 的方式及金膠輔以銀染可以標定胞外粘質外,其餘染劑皆不能使胞外粘質呈色。分別以蛋白質及碳水化合物水解酵素處理胞外粘質,胞外粘質可以被蛋白質酵素trypsin、α-chymotrypsin及 碳水化合物類酵素laminarinase所分解,卻不能被 proteaseVIII、proteaseXIV、pepsin、α-galactosidase、β-galactosidase、α-D-mannosidase、β-1,3-D-glucanase、chitinase、novozyme及lysing enzyme等分解,可知ECM含有精胺酸(arginine)、離胺酸(lysine)等鹼性胺酸及β-1,3/1,4-glucans之組成。以異硫氰酸鉀螢光劑(fluorescein isothiocyanate, FITC)標記的細胞凝聚素白鳳豆素(Concanavalin A, Con A)及麥芽凝聚素(wheatgerm agglutinin, WGA)標定芒果炭疽病菌分生孢子及發芽管,結果顯示Con A會與孢子、發芽管及附著器結合,顯示細胞壁具有甘露糖(mannose)成分。而 WGA對發芽的分生孢子、發芽管、附著器及胞外粘質具有親和性,顯示它們亦具有乙醯葡萄糖胺(N-acetylglucosamine)或幾丁質組成。 |
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