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題 名 | Purification and Properties of Fatty Acid Esterases from Yam (Dioscorea Batatas Decne) Tuber=純化與定性山藥塊莖中的脂肪酸酯酶 |
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作 者 | 侯文琪; 陳顯榮; 張秋芳; 林耀輝; | 書刊名 | Botanical Bulletin of Academia Sinica |
卷 期 | 40:4 1999.10[民88.10] |
頁 次 | 頁305-310 |
分類號 | 434.3 |
關鍵詞 | 山藥; 脂肪酸酯酶; 純化; Dioscorea batatas decne; Fatty acid esterase; FAE; β-naphthyl caprate; β-naphthyl myristate; Purification; |
語 文 | 英文(English) |
中文摘要 | 以β-naphthyl myristate(十四碳脂肪酸酯) 為基質, 我們純化山藥 (Dioscorea batatas Decne) 塊莖中的脂肪酸醋? (FAEs) 。經過 DE-52 離子交換管柱層析與 Sephadex G-75 膠濾層析,兩個 FAE 區分被分離開 ( 命名為 FAEI 和 FAEII), 兩個區分各別進一步以 Con A Sepharose 4B 親和管柱層析純化。FAEI 和 FAEII 在 SDS-PAGE 膠片上,含有相同的三條蛋白質帶其分子量的分布為 50.64kDa, 並且皆相對應於其脂肪酸酪?的活性。以β- naphthyl esters 為基質, 在 pH4.0, 5.0 和 6.0 下, 兩個 FAE 區分最適水解的脂肪酸?碳數皆為十碳的脂肪酸, 最大值在 pH 5.0 。以β-naphthyl caprate(十碳脂肪酸酯) 為基質在37 ℃,PH5.0 下, FAE I 和 FAE II 的Km與 Kmax 分別為 0.338 與 0.959mM;0.405 和 0585nmole β-naphthol/min μg protein 。FAE 在 5O℃下安定 , 超過的65℃則失去所有的活性。 |
英文摘要 | Using B-naphthyl myristate (C14 fatty acid ester) as a screening substrate, we purified fatty acid esterases (FAEs) from yam (Dioscorea batatas Decne) tuber. Two FAE fractions (named FAE I and FAE II) were obtained after DE-52 ion exchange chromatography and Sephadex G-75 gel filtration purification steps, and then further purified by Con A Sepharose 4B affinity chromatography. FAE I and II fractions contained the same three protein bands about 50-64 kDa corresponding to esterase activity bands on SDS-PAGE gels. Among β-naphthyl esters determined at pH 4.0, 5.0 and 6.0 the best substrate for both FAE fractions was a C,0-containing one with a maximum pH at 5.0. The K and V for β-naphthyl caprate (C10 fatty acid ester) of FAE I and II at 37°C, pH 5.0 were 0.338 and 0.959 mM; 0.405 and 0.585 nmole β-naphthol/min μg protein, respectively. FAE activity was stable |
本系統中英文摘要資訊取自各篇刊載內容。