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題 名 | Serologic Diagnosis of Classical Swine Fever Virus: Use of Recombinant Antigens (Core and E2) in Enzyme-Linked Immunosorbent Assays=豬瘟病毒之血清學診斷:利用重組抗原(核蛋白及醣蛋白E2)於酵素連結免疫吸附試驗(ELISA) |
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作 者 | 劉昭君; 王孟亮; 黃千衿; 張天傑; | 書刊名 | 臺灣畜牧獸醫學會會報 |
卷 期 | 67:3/4 民86.12 |
頁 次 | 頁127-134 |
分類號 | 437.245 |
關鍵詞 | 豬瘟病毒; 酵素連結免疫吸附試驗; Classical swine fever virus; ELISA; |
語 文 | 英文(English) |
中文摘要 | 本實驗將豬瘟病毒LPC株之核蛋白及p97林之gp55(E2)基因轉殖至表現載體 pET32b 和 pET32c,並將此重組質體送入大腸桿菌 BL21(DE3) 中之進行表現。 使用 SDS- PAGE 分 析經 IPTG 激化過之細胞的萃取蛋白,結果顯示柱分子量相當於核蛋 38.5kDa 及 gp55(E2) 61kDa 處出現明顯的環帶,和預期重組基因產物的大小相符; 而未受激化的對照組則闕如。 此外,以豬瘟病毒多價抗體進行西方墨點法,其結果方可證實此表現的融合蛋白帶有豬瘟病 毒蛋白之抗原性。 按著,利用親和性層析法 (affinity chromatography) 快速將該等產物 純化,並以此表現的融合蛋白,個別或混合之,當作抗原結合至 96 格的盤子上,用來進行 野外豬隻血清酵素連結免疫吸附試驗 (ELISA) 之測試。 |
英文摘要 | The cDNA of core gene of classical swine fever virus (CSFV ) (LPC strain) and gp55 (E2) of CSFV (p97 strain) were cloned into expression vectors pET32b and pET32c, respectively, and expressed in E. coli. Results from SDS-PAGE revealed the presence of prominently stained bands corresponding to molecular mass of fusion products of 38.5 kDa (corresponding to core) and 61 kDa (E2), respectively. Both products exhibited strong reactivity to CSFV antiserum by western blotting. Purification of the core and E2 fusion proteins were achieved by a single-step affinity chromatography and the purified products could be recognized by the sera of CSFV-infected swine in enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). |
本系統中英文摘要資訊取自各篇刊載內容。