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題名 | 電針刺激大白鼠後鎮痛「有效反應」與「無效反應」之研究及c-fos細胞致癌基因在脊髓背角之表現=The Molecular Mechanism of Electroacupuncture Analgesia the Modification of Expression of c-fos Proto-Oncogene in Rat Spinal Dorsal Horn Induced by Formalin Stimulation |
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作者 | 孫維仁; | 書刊名 | 中醫藥年報 |
卷期 | 15:1 1997.05[民86.05] |
頁次 | 頁400-421 |
分類號 | 413.91 |
關鍵詞 | 針灸; c-fos原致癌基因; 閃尾試驗; 有反應者/無反應者; 那囉克松; 福馬林試驗; Acupuncture; c-fos protooncogenes; Tail flick test; Responder/non-responder; Naloxone; Formalin test; DINC; |
語文 | 中文(Chinese) |
中文摘要 | 在人體及動物的針刺鎮痛的研究中顯示,並非所有的受測對象都可以獲得止痛, 約 30 ~ 50% 無法得到, 這就是目前所熟知的針刺「有反應者」 (responder) 及「無反應 者」 (non-responder)。研究顯示,這種現象不僅是與生俱來,往往隨著反覆刺激或外在藥 物的施與而有巧妙的改變。近年的研究指出,經由類嗎啡拮抗劑可以使「有效反應」轉成「 無效反應」,反之,內源性類嗎啡分解酵素拮抗劑可以使「無效及應」轉成「有效反應」, 而且電針耐受性的現象似乎也和這種動態的轉換息息相關,可惜有關的分子生物學機轉卻無 人報導。 以 c-fos 細胞致癌基因 (Proto-oncogene) 活動度來作為實驗動物疼痛的指標, 走近年來疼痛學研究中嶄新的方法,它不止在神經核中可以用型態學的方法固定,量化和比 較,且其精確性、可重覆性、及穩定性遠比傳統的行為觀察更為優益,而更重要的是 c-fos 的誘導與調節機制,已在分子生物學的研究中得到強烈的佐証,與細胞內訊息傳遞息息相關 。原致癌基因 (proto-oncogene) c-fos 可在數十分鐘內對各種傷害性刺激 (包括溫度的、 機械的、化學的 ) 產生反應,生成 Fos 核蛋白來擔任細胞核的「第三級信差」,負責傳遞 細胞外短暫的訊息至細胞核內的目標基因,並使細胞功能發生長期的改變,此過程可經由脊 髓背角的 Fos 樣免疫反應活性 (Fos-like- immunoreactivity,FLI) 的大量表達而呈現出 來。FLI 細胞的出現,可作疼痛刺激定性、定量、及定位的研究,藉由此型態學表現和疼痛 強弱成正比,而有所謂疼痛型態學標記。利用這些優點,我們比較雷針刺激後,有止痛反應 與無止痛及應的大白鼠在脊髓背角 Fos 樣免疫反應 (Fos-ike imunoreactivity; 簡稱 Fos-LI) 的差異,及其分子生物學機轉是否有不同的表現。本實驗主要分成兩部份,第一部 份比較電針刺激後,有止痛反應與無止痛反應的大白鼠在 Fos-LI 的差異,同時又比較各種 嗎啡受禮的拮抗劑 (分別是 m 受體, naloxone, d 受體: ICI174864, 及 k 受體, naltrexone ),及內源性類嗎啡分解酵素的抑制劑 (D-phenylalanine, 簡稱 DPA) 注射後 ,對老鼠疼痛行為及 Fos-LI 表現上的改變。由於電針刺激後大部份老鼠行為模式上出現「 電針致病」的現象,我們進行第二部份的實驗,利用對清醒及氣體麻醉大白鼠兩側後肢足三 里穴位作雷針刺激, 並在左後足底以福馬林注射產生傷害刺激,經脊髓背角的 c-fos 神經 元免疫組織化學染色法,研究電針刺激與傷害性刺激對脊髓背角神經元的不同意義,發現低 頻或高頻電針刺激, 均可抑制氣體麻醉下大白鼠脊髓背角對傷害性刺激的 c-fos 表達,此 止痛作用會受到 naloxane 的拮抗而降低。最後歸納此種止痛機轉可能是藉由激活內源性鴉 片系統的興奮,而有別於「以痛制痛」的理論。 |
英文摘要 | Fos protein encoded by c-fos protooncogene has been accepted as a nuclear "third messenger" molecule that responses to many noxious stimulation (includes thermal, chemical, mechanical etc.) within 20-60 minutes and couples short-term extracellular signals to long-term alternations in cell function, by regulating the expression of specific target gene. This process can be simply detected by Fos-like-immunoreactivity (FLI) neurons labeling in spinal dorsal horn which are proposed as molecular markers of pain intensity. Numerous studies of electroacupuncture analgesia have been documented since 1970's, however, the underlying mechanism remains to be determined, ie the debate between the "opioid mechanism" and "diffuse noxious inhibitory control" (DINC). The present study was designed to investigate the discrepancy among these two theories by ob~er- ving the c-fos expression in the spinal dorsal horn of rats induced by electroacupuncture and noxious stimulation (formalin injection). A second objective was to evaluate the analgesic effect of low-frequency (4 Hz) and hiph-frequency (100Hz) e- lectroacupuncture and the antagonistic effect of nalosane via the suppression and reproduction of c-fos expression of spinal cord. |
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